рефераты конспекты курсовые дипломные лекции шпоры

Реферат Курсовая Конспект

Лекция 7. ЭЛЕКТРОФОРЕЗ

Лекция 7. ЭЛЕКТРОФОРЕЗ - раздел Энергетика, Лекция 7. Электрофорез   ...

Лекция 7. ЭЛЕКТРОФОРЕЗ

 

Электрофоретические эксперименты

Другое направление объединяло различные электрофоретические методы в поддерживающей среде из различных носителей. Двумерный электрофорез в… Появился также новый метод для разделения макромолекул, капиллярная… В этой Лекции мы сначала обсудим метод свободного электрофореза в растворе. Недавние инновации в этом методе вселяют…

Макромолекулы в электрическом поле

Заряд молекулы и ее электрофоретическая подвижность Заряд – фундаментальное свойство молекул, которое тесно связано с их… F = Q E (26.1)

Электрофоретические методы в отсутствие поддерживающей среды: свободный электрофорез

Различные методы электрофореза пока широко не используются в качестве зонда структуры. Причина проста: сложные взаимодействия между ионами,…  

Электрофоретические методы в присутствии поддерживающей среды: зональный электрофорез

Агарозные гели Агароза – линейный природный полисахарид, выделенный из содержащих агар…

Разделение по массе и заряду: двумерный гель-электрофорез

Двумерный электрофорезобъединяет два метода: изоэлектрофокусировку IEF с SDS-электрофорезом в полиакриламидном геле. Этот объединенный метод называется кратко двумерным электрофорезом (2DE – от англ. Two-dimensional Electrophoresis) и в настоящее время является наиболее используемым аналитическим методом для разделения белков.

На первом этапе этого метода полипептидные цепи разделяют методом изоэлектрического фокусирования IEF. При таком изоэлектрическом фокусировании белки подвергаются электрофорезу в узкой трубочке, заполненной полиакриламидным гелем, в котором с помощью специальных буферов создается градиент рН. Под действием электрического поля каждый белок перемещается в ту зону градиента, которая соответствует его изоэлектрической точке и остается в ней. Так происходит разделение белков в одном направлении двумерного гель-электрофореза.

На втором этапе трубочка геля, содержащего разделенные белки, снова подвергается электрофорезу, на этот раз в направлении перпендикулярном тому, что на первом этапе. В этом случае электрофорез ведут в присутствии SDS и белки разделяют по их молекулярной массе, как в одномерном SDS-PAGE. Так осуществляется разделение во втором направлении двумерного гель-электрофореза (рис. 26.13).

Рис. 26.13. Общий принцип двумерного электрофореза. Объяснение в тексте.

 

Неразделенными в результате остаются только те белки, которые неразличимы как по изоэлектрической точке, так и по молекулярной массе; такое сочетание встречается очень редко. Используя различные методы окрашивания белков, можно выявить следовые количества практически всех полипептидных цепей. За один раз методом двумерного гель-электрофореза можно разделить до 2000 отдельных полипептидных цепей; этого достаточно, чтобы выявить большинство бактериальных белков. Разрешение этого метода настолько велико, что позволяет разделить два практически идентичных белка, отличающихся одной заряженной аминокислотой.

Уже первые эксперименты по разделению белков показали колоссальные возможности метода. Так, 1100 белков из E. coli были разделены в одном опыте. Было предсказано, что до 5000 белков могут быть разделены методом двумерного электрофореза. Несмотря на эти выдающиеся возможности и широкое применение для решения различных задач, почти 20 лет прошло, пока метод двумерного электрофореза стал составной частью протеомики.

Способность метода разделять одновременно большое число белков, затем идентифицировать индивидуальные белки как химическим анализом их концевых аминокислотных последовательностей, так и с помощью поиска этих последовательностей в компьютерных базах данных, привела к быстрому пополнению наших знаний о белковых компонентах клетки. Более того, сейчас с помощью этого метода можно следить за экспрессией практически всех белков в клетке и сравнивать информацию, идущую от «нормальных» и «аномальных» клеток. На рисунке 26.14 представлена типичная картина двумерного гель-электрофореза на примере разделения белков из 30S рибосомных частиц.

(а) (б)

 

Рис. 26.14. Электрофоретическое разделение белков 30S рибосомной частицы из E. coli (левая панель) из T. thermophilus (правая панель. Электрофорез в первом направлении выполняется при кислом значении рH (5.5). Во втором направлении используется 15% SDS-PAGE. Сравнение результатов электрофоретического разделения белков 30S субчастицы из E. coli и T. thermophilus в этой системе показало, что пятно в положении, обозначенном (►) в правой половине рисунка, соответствуют пятну белка S1 из E. coli в левой половине рисунка

 

Капиллярный электрофорез

  Одномерный капиллярный электрофорез Как предполагает название, при проведении CE образец перемещается в очень узких капиллярах, внутренний диаметр которых…

Капиллярная электрохроматография

Успехи в капиллярной жидкостной хроматографии и в капиллярном электрофорезе ускорили развитие новой методики, получившей название капиллярная… По существу, капиллярная электрохроматография является гибридом жидкостной… Стационарная фаза может быть образована на основе шариков кварца, упакованных внутри капилляра, или фиксированного на…

– Конец работы –

Используемые теги: Лекция, Электрофорез0.058

Если Вам нужно дополнительный материал на эту тему, или Вы не нашли то, что искали, рекомендуем воспользоваться поиском по нашей базе работ: Лекция 7. ЭЛЕКТРОФОРЕЗ

Что будем делать с полученным материалом:

Если этот материал оказался полезным для Вас, Вы можете сохранить его на свою страничку в социальных сетях:

Еще рефераты, курсовые, дипломные работы на эту тему:

Учебная программа курса. 4. Лекция 1. История психологии как наука. 5. Лекция 2. Античная философия и психология. 6. Лекция 3. Развитие психологии в Средневековый период. 19. Лекция 16. Тревога и защита
Введение... Учебная программа курса... Рабочая программа курса Лекция История психологии как наука...

Лекции 1.ОСНОВНЫЕ ПОНЯТИЯ И КАТЕГОРИЯ ИНФОРМАТИКИ. 2 ЛЕКЦИИ 2. МАТЕМАТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ИНФОРМАТИКИ. СИСТЕМЫ СЧИСЛЕНИЯ. 12 ЛЕКЦИЯ 3. АППАРАТНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ ЭВМ. 20 ЛЕКЦИЯ 4. ПРОГРАММНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ КОМПЬЮТЕРОВ.. 49 Широко распространён также англоязычный вар
gl ОГЛАВЛЕНИЕ... Лекции ОСНОВНЫЕ ПОНЯТИЯ И КАТЕГОРИЯ ИНФОРМАТИКИ... ЛЕКЦИИ МАТЕМАТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ИНФОРМАТИКИ СИСТЕМЫ СЧИСЛЕНИЯ...

ЛЕКЦИЯ № 1. Факторы выживания в природной среде ЛЕКЦИЯ № 2. Обеспечение водой ЛЕКЦИЯ № 3. Обеспечение питанием ЛЕКЦИИ по ОБЖ
КЛАСС Содержание Стр I четверть ЛЕКЦИЯ Факторы выживания в природной среде ЛЕКЦИЯ... ЛЕКЦИЯ Факторы выживания в природной... ЛЕКЦИЯ Обеспечение питанием...

Лекция первая. ИСТОРИЯ СОЦИОЛОГИИ КАК ОБЛАСТЬ ЗНАНИЯ Лекция вторая. ИЗ КАКИХ ИДЕЙ РОДИЛАСЬ СОЦИОЛОГИЯ: ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНЫЕ ИСТОКИ НОВОЙ НАУКИ Лекция третья. СОЦИОЛОГИЯ ОГЮСТА КОНТА ЛЕКЦИИ
Оглавление... ОТ АВТОРА... Лекция первая ИСТОРИЯ СОЦИОЛОГИИ КАК ОБЛАСТЬ ЗНАНИЯ Лекция вторая ИЗ КАКИХ ИДЕЙ РОДИЛАСЬ СОЦИОЛОГИЯ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНЫЕ ИСТОКИ НОВОЙ НАУКИ...

ЛЕКЦИИ Лекция первая.ИСТОРИЯ СОЦИОЛОГИИ КАК ОБЛАСТЬ ЗНАНИЯ Лекция вторая. ИЗ КАКИХ ИДЕЙ РОДИЛАСЬ СОЦИОЛОГИЯ: ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНЫЕ ИСТОКИ НОВОЙ НАУКИ Библиотека
Библиотека... Учебной и научной литературы...

Курс русской истории Лекции I—XXXII КУРС РУССКОЙ ИСТОРИИ Лекции I—XXXII ЛЕКЦИЯ I Научная задача изучения местной истории
Все книги автора... Эта же книга в других форматах... Приятного чтения...

ЛЕКЦИИ ПО КУРСУ ИНФОРМАТИКА Лекция 1. Введение. История информатики. Измерение
Лекция... Введение История информатики Измерение...

ЛЕКЦИИ ПО ИНФОРМАТИКЕ ЛЕКЦИЯ №1 ИСТОРИЯ РАЗВИТИЯ ВЫЧИСЛИТЕЛЬНОЙ ТЕХНИКИ
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования... Самарский государственный технический университет... ЛЕКЦИИ ПО ИНФОРМАТИКЕ...

ВВЕДЕНИЕ В ПРОФЕССИЮ «СОЦИАЛЬНЫЙ ПЕДАГОГ» ЛЕКЦИЯ 1. КУЛЬТУРНО-ИСТОРИЧЕСКИЕ ПРЕДПОСЫЛКИ ВОЗНИКНОВЕНИЯ СОЦИАЛЬНОЙ ПЕДАГОГИКИ В РОССИИ. ЛЕКЦИЯ 2. ПРОФЕССИОНАЛЬНАЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ СОЦИАЛЬНОГО ПЕДАГОГА
Учеб пособие для студ высш учеб заведений М Гуманит изд центр ВЛАДОС с Авторы Галагузова М А Галагузова Ю Н Штинова... ВВЕДЕНИЕ В ПРОФЕССИЮ СОЦИАЛЬНЫЙ ПЕДАГОГ ЛЕКЦИЯ КУЛЬТУРНО ИСТОРИЧЕСКИЕ... Вопросы для самоконтроля Каковы культурно исторические традиции благотворительности и милосердия в России Какие...

Лекция по теме рабочего плана. Самостоятельное конспектирование материала по ходу лекции
конспект лекций... Методические указания по изучению... Лекция по теме рабочего плана Самостоятельное конспектирование материала по ходу...

0.056
Хотите получать на электронную почту самые свежие новости?
Education Insider Sample
Подпишитесь на Нашу рассылку
Наша политика приватности обеспечивает 100% безопасность и анонимность Ваших E-Mail
Реклама
Соответствующий теме материал
  • Похожее
  • По категориям
  • По работам